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最新消息| 無菌室管理要求 | 2023-01-31 |
| 文章来源：由「百度新聞」平台非商業用途取用"https://new.qq.com/omn/20211221/20211221a03y6a00.html" 無菌室的要求：1、需要建立無菌室管理制度。2、保持良好的衛生：相對濕度40%---60%，溫度20—22℃，最好安裝空調。3、無菌室不得進行其他工作，非操作所使用的物件一律不得放入，檢后的余樣不得存放。4、紫外燈的使用期限一般為300小時，要記錄使用時間，到期更換。無菌操作及要求以菌落總數、大腸菌群為例演示無菌實驗流程1、實驗前準備工作：對實驗臺、手、檢驗用具進行消毒（保證無菌環境和無菌實驗用品），微生物的理想環境是無菌，但是更應該做好防護，保護自己。防護衣服，口罩手套必須佩帶。對實驗的臺面進行擦拭消毒，一般用75%乙醇或新潔爾滅溶液。為保持無菌的進行，對手心手腕這些容易殘留細菌的部位進行消毒處理。實驗臺、手（小腕）、檢驗樣品消毒實驗臺上面的藥品、盛裝樣品的盒子等實驗用工具要進行消毒處理。實驗前對培養基的檢查、無菌條件下稱樣1）實驗前檢查大腸菌群培養基的量、導氣管內是否有氣泡。2）開啟超凈臺風機、在無菌、空氣緩慢流動狀態下工作。3）進行無菌稱樣，這一步其實最好是要佩帶手套的。進行無菌接菌實例1）已干熱滅菌的吸管使用前過火焰滅菌。2）無菌吸樣3）無菌接種無菌傾倒菌落總數培養基大腸菌群復發酵接菌（接菌環使用）1）接種針滅菌2）接菌試管口滅菌3）取菌在接種或向培養皿內倒培養基時，試管口或瓶壁外面不要接觸皿底，試管或瓶口應傾斜一下在火焰上通過。總結微生物實驗室工作人員，必須有嚴格的無菌觀念，許多實驗要求在無菌的條件下進行，主要原因：一是防止試驗操作中人為污染樣品，二是保證工作人員安全，防止檢出的致病菌由于操作不當造成個人污染。要求如下：無菌室使用與管理要求1．工作室應矮小、平整，面積小，高2.2―2.3米，內部裝修應平整、光滑，無凹凸不平或棱角等，四壁及屋頂應用不透水之材質，便于擦洗及殺菌。2．室內采光面積大，從室外應能看到室內情況。3．為保證無菌室的潔凈，無菌室周圍需設緩沖走廊，走廊旁再設緩沖間，其面積可小于無菌室。4．無菌室、緩沖走廊及緩沖間均設有日光燈及供消毒空氣用紫外燈，殺菌紫外燈離工作臺以1米為宜，其電源開關均應設在室外。5．無菌室與緩沖間進出口應設拉門，門與窗平齊，門縫要封緊，兩門應錯開，以免空氣對流造成污染。6．無菌室的使用與管理（1）無菌室應保持清潔整齊，室內僅存放必須的檢驗用具如酒精燈、酒精棉、火柴、鑷子、接種針、接種環等。不要放與檢測無關的物品（2）室內檢驗用具及凳桌等保持固定位置，不隨便移動。（3）每2―3周用2%石炭酸水溶液擦拭工作臺、門、窗、桌、椅及地面，然后用3%石炭酸水溶液噴霧消毒空氣，最后紫外燈殺菌半小時。（4）定期檢查室內空氣無菌狀況，細菌數應控制在10個以下，發現不符合要求時，應立即徹底消毒滅菌。無菌室無菌程度的測定方法：取普通肉湯瓊脂平板、改良馬丁培養基平板各3個（平板直徑均9厘米），置無菌室各工作位置上，開蓋曝露半小時，然后倒置進行培養，測細菌總數應置37℃溫箱培養48小時；測霉菌數則應置27℃溫箱培養5天。細菌、霉菌總數均不得超過10個為合格。（5）無菌室殺菌前，應將所有物品置于操作之部位（待檢物例外），然后打開紫外燈殺菌30分鐘，時間一到，關閉紫外燈待用。（6）進入無菌室前，必須于緩沖間更換消毒過的工作服、工作帽及工作鞋。（7）操作應嚴格按照無菌操作規定進行，操作中少說話，不喧嘩，以保持環境的無菌狀態。器材及場所的滅菌消毒微生物檢驗用器材及場所必須進行滅菌或消毒處理，不同的對象采用不同的處理方法。1.高壓蒸汽滅菌:工作服、口罩、稀釋液等，置高壓殺菌鍋內，一般采用121℃滅菌半小時,當然不同的培養基有不同的要求,應分別處理。2.火焰滅菌：接種針、接種環等可直接火焰滅菌。3.高溫干燥滅菌：各種玻璃器皿、注射器、吸管等，置于燥箱中160℃滅菌2小時。4.一般消毒:無菌室內的凳、工作臺、試管架、天平、待檢物容器或包裝均無法進行滅菌，必須用其他方法進行消毒處理，采用2%石炭酸或來蘇兒水溶液擦拭消毒，工作人員的手也用此法進行消毒。5.空氣的消毒：開啟紫外燈照射30―60分鐘即可。準備工作1.先進行無菌室空間的消毒，開啟紫外燈30-60分鐘。2.檢驗用的有關器材，搬入無菌室前必須分別進會滅菌消毒。3.操作人員必須將手清洗消毒，穿戴好無菌工作衣、帽和鞋，才能進入無菌室。4.進入無菌室后再一次消毒手部，然后才進行檢驗操作。操作過程注意事項1.動作要輕，不能太快，以免攪動空氣增加污染；玻璃器皿也應輕取輕放，以免破損污染環境。2.操作應在近火焰區進行。3.接種環、接種針等金屬器材使用前后均需灼燒，灼燒時先通過內焰，使殘物烘干后再灼燒滅菌。4.使用吸管時，切勿用嘴直接吸、吹吸管，而必須用洗耳球操作。5.觀察平板時不好開蓋，如欲沾取菌落檢查時，必需靠近火焰區操作，平皿蓋也不能大開，而是上下蓋適當開縫。6.進行可疑致病菌涂片染色時，應使用夾子夾持玻片，切勿用手直接拿玻片，以免造成污染，用過的玻片也應置于消毒液中浸泡消毒，然后再洗滌。7.工作結束，收拾好工作臺上的樣品及器材，最后用消毒液擦拭工作臺。來源：食品論壇、食品微生物檢測 關鍵字標籤：實驗室無菌操作台 |
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